Fluo-8 AM钙离子荧光探针系列简介
Fluo-8(Fluo-2 Medium Affinity),是目前zui亮的可见光激发波长Ca2+荧光探针,其荧光强度比Fluo-4强两倍,比Fluo-3强四倍。Fluo-8具中等程度的Ca2+亲和力,几乎接近Fluo-3,Fluo-4(Fluo-3:Kd=0.4μM、Fluo-4:Kd=0.36μM、Fluo-4:Kd=0.389μM),使用上几乎同Fluo-3和Fluo-4。Fluo-8不仅维持Fluo-3,Fluo-4便捷的光谱检测特性,与Ca2+结合后的zui大激发波长为490nm,zui大发射波长为514nm。而且具有改善的细胞载入和Ca2+响应能力。Fluo-8加载具较弱的温度依赖性,在室温或37℃孵育皆染色良好,不像Fluo-3,Fluo-4严格要求在37℃孵育,此特征使其更适用于HTS高通量筛选实验。Fluo-8应用广泛,与许多细胞系和靶向样本兼容,不会受配体或靶标本身信号干扰。Fluo-8可通过激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光显微镜等来检测胞内钙离子水平的变化。
可见光激发Ca2+荧光探针的优势:
与紫外光激发的荧光探针相比,如Fura-2和Indo-1,可见光激发Ca2+探针具有以下特点:
1)适用于大多数的激光共聚焦测钙系统,包括共聚焦激发扫描显微镜以及流式细胞仪等。
2)具有更强的染料吸收性能,使得更低浓度的探针即可成功检测Ca2+变化,从而降低对活细胞的光毒性。
3)Ca2+依赖性荧光强度增强,对Ca2+变化水平检测敏感度更高。
4)降低样品自荧光以及光散射的干扰。
5)兼容光激活探针以及UV-激发试剂,因此更方便于多参数检测。
6)无光谱偏移。
Fluo-8,AM相比较于Fluo-3,Fluo-4的优势:
1)目前zui亮的可见光激发波长Ca2+荧光探针,荧光强度是Fluo-4的两倍,Fluo-3的四倍;
2)荧光探针加载更灵活快速,室温或37℃孵育染色效果好,不像Fluo-3、Fluo-4严格要求在37℃孵育;
3)维持Fluo-3、Fluo-4的检测光谱特性,与Ca2+结合后的zui大激发波长为490nm,zui大发射波长为514nm。4)50μg小包装供应,使用方便,且能很好保证产品的稳定性。
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